2015年第50卷第7期生物学通报53拟南芥实验室种植栽培要领*
张庆友1,2孙新月1,3**兰伟1许树成1***祝雪兰1,4***
(1阜阳师范学院生物与食品工程学院安徽阜阳2360412余姚市第三中学
安徽阜阳浙江余姚3154103阜南县实验中学安徽阜南2363004阜阳市红旗中学236000)
摘要拟南芥既是重要的生物学科研材料,又是代表性模式植物。虽然国际上有成熟的拟
南芥种植技术,但并不适用于一般生物学实验室。影响拟南芥生长发育的环境条件、理化因素较多,分析和研究其种植栽培关键要点,对面向社会的生物学教学和科普尤为重要。着重研究了普通生物学实验室内拟南芥的有土栽培方法和技术要点,为拟南芥室内栽培种植提供参考和科学依据。关键词拟南芥实验室种植栽培要领生物学教学植物科普
中国图书分类号:Q-4文献标识码:B
后再播种。用牙签蘸取经过春化消毒后的种子,点
播在培养土的表面,直径10cm 左右的培养盆内
盆播5~6点,每点播2~3粒,播种后用保鲜膜覆
盖培养盆,并在保鲜膜上用大头针或牙签扎5~6
个孔。若培养土表面不够湿润,可在点播好的种子
上滴2~3滴清水。播种后置于人工智能培养箱中
培养。培养条件设置为:光照4000lx ,16h ,温度0引言拟南芥(Arabidopsis thaliana )作为经典常规的模式植物,具有“植物界的果蝇”之称,属于十字花科(Brassicaceae )拟南芥属(Arabidopsis ),我国植物分类学者称之为鼠耳芥。因其植株小、生活周期短、生态类型丰富、分布广、基因组小(2n=10,基因组大小为125Mb ),容易进行诱变和遗传转
化[1],拟南芥广泛应用于分子生物学、植物遗传
学、发育生物学、功能基因组学等众多研究领域。25℃,空气相对湿度75%;黑暗8h ,温度22℃,空气相对湿度75%。
出苗后适时浇灌营养液,对幼苗生长很重要,
营养液配方见表1。
表1拟南芥培养液母液配方2000年,拟南芥基因组全序列测定工作已完成。目前国际上已有成熟的拟南芥栽培方法和材料,然而普通生物学实验条件下有效繁育所需要
的拟南芥生态型或品系植株并非易事[2,3]。在拟南
芥培养过程中,光照时间及强度、培养室温度、空
气湿度、pH 值、营养条件等对拟南芥的生长发育
影响至关重要[3,4]。实验室内的实际种植方法需要
不断摸索和改进。12341mol/L1mol/L1mol/L20mmol/LKNO 3·Ca (NO 3)24H 2O ·7H 2O MgSO 4101.1g 236.15g 246.48g 5.57g 7.45g
130.4g
9.12g
0.434g
1.7626g
0.0798g
0.172g
0.0432g
0.585g
0.00129g Fe ·EDTA FeSO 4EDTA KH 2PO 3·3H 2O K 2HPO 4各自配成溶液,再混合1材料方法1.1材料拟南芥为哥伦比亚型(Col ,Columbia )和兰德伯格(Ler ,Landsberg erecta )生态型;培养基质为公园土和校园土。51mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.6)H 3BO 3·H 2O MnSO 4·H 2O CuSO 41.2方法本实验采用土培直播法进行拟南芥的繁育。在培养盆底部覆盖一张干净的纸,将混合均匀的培养土装入培养盆中,并将培养盆放置在托盘上,一个托盘可放置1个或多个培养盆。播种
前先在托盘内加入适量清水,待培养土表面润湿
*基金项目:阜阳师范学院教研项目(2012JYXM55)
**并列第一作者
***通信作者6MS 微量元素·7H 2O ZnSO 4·2H 2O NaMO 4NaCl ·6H 2O CoCl 2以上母液均配制成1L
54生物学通报2015年第50卷第7期2
2.1结果分析各发育期栽培要点分析
苗期实验室栽培条件下,拟南芥播种后右),后者茎略显纤柔(图2左、图3左)。2.3影响拟南芥生长的主要因素1)湿度。维持2.1.1培养土的湿度是拟南芥种子萌发所必须的条件,
拟南芥喜湿润,最佳的生长环境为空气相对湿度
大于80%的温室。播种后需覆膜,以增加湿度,促
进拟南芥的萌发。2~3d 即可发芽(图1,本文附图见封三),发芽后的管理十分关键,否则极易死苗。出苗2~3周后,可进行适当间苗。理论上每穴留1~2株壮苗,未
出苗的穴可移苗补齐,每盆7~8株。间苗时用牙
签缓缓挑出幼苗,不可伤及根系。间苗时间也不宜
太晚,否则易伤及临近植株。间苗后覆上保鲜膜并
在其上扎小孔,进行缓苗。拟南芥不仅喜光照、而
且对湿度要求较高,因此,土壤含水量要高,一般
保持土壤表面湿润即可,水一般从培养器皿底部
吸入,而不是直接喷洒[5]。出苗后4~5周开始浇灌
营养液(表1)。营养液的量要适宜,以促进幼苗的
生长。水和营养液均加入托盘即可,直接给拟南芥
植株浇水,容易折损拟南芥植株或使其烂根。2)pH 值。在育苗期间,培养土(基)的pH 值应调整在5.5~5.8之间,过高或过低会降低种子的发芽率。3)水分要求。普通泥土培养基一般要浇营养液,但不必每天浇,可根据托盘大小安排。应注意及时浇水,托盆中不能长时间缺水,应表面土壤一干即浇,但托盆中的水也不宜太多,水分过多易导致烂根。4)温度。22℃培养箱恒温培养的植株生长较快,4~5周即开花,果实1周左右成熟。自然温度下
(8-10月期间,8~30℃,日均温
慢,但很健壮,6周左右可开花,果实成熟时间约2~2.1.2成株期拟南芥成株期植株较高,可在培养盆内插入细木条,供其攀爬,以防倒伏(图2)。此
时,适宜的营养及水分也十分重要,可根据培养土
的湿润情况,增加或减少水量。3周。培养箱培养温度高于28℃开花和结实均受到影响,花形态发育不正常花苞易干枯而败育,有的
花可形成果实,但多内空或种子小,不饱满。2.1.3花期如图3所示,拟南芥虽是自花传粉
植物,但在花期也应将不同生态型或基因型的植
株进行人工隔离,以防交叉传粉[6]。浇水及追施营
养液时尽量不要碰触植株,以防花粉大量散落,影
响结实。5)光照及光强。在培养箱中培养一般16h 光照,8h 黑暗,光照强度4000lx 条件下生长较好。6)培养土。拟南芥适宜在通气状况良好的基质上生长,粘质土壤易导致烂根,造成根系活力降
低,影响开花生长。
此外,植株密度、真菌及病虫害等都能影响拟
南芥的正常生长, 在种植拟南芥的过程中也需注意。2.1.4种子收获种子成熟后,用剪刀将成熟的荚果剪下,放在白纸上,然后用手指轻轻搓揉荚果,动作要轻缓,待种子完全散落后,将种荚果壳
取走,最后,将种子(图4)倒入1.5mL 的离心管
中保存。3讨论及展望植物科普是科学普及工作的重要组成部分。
2.2拟南芥实验室条件下生长状况比较经过然而提到植物科普,人们往往只想到植物多样性、
植物与生态、植物进化等方面。事实上,1970年
以来互联网信息技术与生物技术突飞猛进的发
展,彻底改变了人类生活。模式植物的研究为生物
技术的发展进步也做出了一定贡献。因此,植物科
普不能忽视模式植物及其突变体的开发应用。让
拟南芥等模式植物及其代表性突变体与社会大众
见面[7,8],使其栽培种植技术为一线生物学工作者
所掌握,实为科普工作的重要一环。
主要参考文献
1吕山花,樊颖伦,张文会,等. 不同pH 对拟南芥生长发育的栽培总结,拟南芥各主要生育期生态学指标统计结果如表2所示。表2实验室条件下拟南芥的生长发育情况统计培养成活率方法直播法(%)开花时莲座始花果荚每荚种子生活周期(周)株高(cm )直径(cm )时间(周)长度(cm )数(个)705~102~34~50.4~0.815~3013~16表2及图1~图4是拟南芥为哥伦比亚型(Col ,Columbia )和兰德伯格(Ler ,Landsberg erecta )生态型植株的主要特征,二者区别不大,仅在外形上前者成株期和花期茎较为直立(图2右、图3
2015年第50卷第7期生物学通报55
“用人口腔上皮细胞提取与鉴定DNA ”的实验改进
桑
摘要希(北京市第十一中学北京100050)“DNA 的粗提取和鉴定”是高二生物学必做的一项实验,鸡血红细胞、菜花、洋葱、
香蕉等实验材料均被广泛采用,各有利弊。推荐一种无成本且易获得的新材料:人口腔上皮细胞。经过几步简单的实验操作可提取到一定量的DNA ,实验现象明显且可以用二苯胺鉴定。
关键词DNA 的提取和鉴定口腔上皮细胞嫩肉粉实验教学
中国图书分类号:Q-33文献标识码:B
1实验选材和实验原理的变迁
“DNA 的粗提取与鉴定”实验为高中必做实漱口1min ,取漱口水加入试管,再加1mL 洗手液,振荡混匀,最后慢慢加入95%冷酒精,不要搅
拌混合,渐渐在溶液分界面上就会出现漂浮的验。以前每次做实验都需要大量购买加了抗凝剂
的鸡血,经静置沉淀获得DNA 含量丰富的鸡血红
细胞。实验步骤虽然复杂,但从选材原因到每次过
滤的目的与取舍,都蕴含着生物学的知识和理论,
实验现象很明显。因禽流感的原因,现多用植物材
料做此实验。洋葱、菜花的优势在于价格便宜,组
织近白色,但前者刺激性强,后者不易研磨,香蕉
价格较贵,但因为是三倍体,DNA 提取量多,总之
各有利弊。实验材料的改变也带来了裂解原理和
操作步骤的相应调整,研磨破壁,洗涤剂裂解细胞
膜,温度与变性的关系,嫩肉粉中蛋白酶的作用
等。再加上DNA 在不同浓度的食盐溶液中溶解度
的差异,二苯胺的鉴定原理等,一节课既讲原理又
做实验,时间相当紧张。DNA ,用玻璃棒缓慢搅动缠绕即可将其带出。如此简单就可以提取DNA ?需要多少口腔上皮才能提取到明显的丝状DNA ?经多次实践证明,这套方案的确可行且现象显著。由于书里给出的0.1g/mL(经计算基本相当于2mol/L,恰好是人教版教材中给出了DNA 溶解度较高的NaCl 浓度)的盐水浓度较高,漱口感觉很咸,而且入口的溶液涉及卫生问题,在称量和溶解的过程中不能使用实验室的器材,所以笔者将第1步进行了调整。随后按选修1中介绍的不同方法分别处理,意在比较提取量的差异;最后加上了鉴定步骤,并用分光光度计测量3种方法处理所得到的DNA 的吸光值,定量分析3种方法的
提取量,从而确认最佳方案。具体操作步骤如下:
第1步:学生自带水杯,含一口温开水漱口,
用手指轻揉双颊有助于口腔上皮细胞脱落,1min
后将漱口水吐入100mL 小烧杯中。从中取50mL
漱口水倒入小烧杯中,再加入5g NaCl 和10mL
稀释6~8倍的洗涤剂,搅拌至溶解,均分成5组
6
7高英杰, 张玮, 赵军锋,等. 拟南芥的室内培养技术进展. 新乡学院学报(自然科学版) ,2008,25(4):47—48. 2应用新材料进行不同实验方案的结果比较笔者在一套美国中小学实验教材《校园科学实验》丛书的《遗传科学实验》分册中看到一篇文章《从颊上皮细胞提取DNA 》,介绍了用人口腔上皮细胞提取DNA 的实验,所用试剂和操作过程如下:将1g 食盐溶解在10mL 蒸馏水中,用该盐水影响. 安徽农业科学,2008,36(29):12579—12580. !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 2
3
4
5于政权, 孙颖. 拟南芥菜室内培养技术的改进. 河北师范大学学报(自然科学版),1999,23(4):499—550. 李俊华, 张艳春, 徐云远,等. 拟南芥室内培养技术. 植物学通报,2004,21(2):201—204. 冯燕妮,李和平,许学勇. 长江中下游地区拟南芥的栽培. 农技服务,2007(1):4—5. 王秀荣, 沈宏, 严小龙. 拟南芥室内繁种技术研究. 华南农业
大学学报(自然科学版),2002,23(3):94.Soon F. F., Ng L. M., Zhou X. E. et al . Molecular Mimicry Regulates ABA Signaling by SnRK2Kinases and PP2C Phos-phatases. Science,2012,335:85—88. 8Fujii H. ,Verslues P. E. ,Zhu K. J.. Arabidopsis decuple mutant reveals the importance of SnRK2kinases in osmotic stress responses in vivo.PNAS, 2011,108:1717—1722. (E -mail :[email protected])
2015年第50卷第7期生物学通报53拟南芥实验室种植栽培要领*
张庆友1,2孙新月1,3**兰伟1许树成1***祝雪兰1,4***
(1阜阳师范学院生物与食品工程学院安徽阜阳2360412余姚市第三中学
安徽阜阳浙江余姚3154103阜南县实验中学安徽阜南2363004阜阳市红旗中学236000)
摘要拟南芥既是重要的生物学科研材料,又是代表性模式植物。虽然国际上有成熟的拟
南芥种植技术,但并不适用于一般生物学实验室。影响拟南芥生长发育的环境条件、理化因素较多,分析和研究其种植栽培关键要点,对面向社会的生物学教学和科普尤为重要。着重研究了普通生物学实验室内拟南芥的有土栽培方法和技术要点,为拟南芥室内栽培种植提供参考和科学依据。关键词拟南芥实验室种植栽培要领生物学教学植物科普
中国图书分类号:Q-4文献标识码:B
后再播种。用牙签蘸取经过春化消毒后的种子,点
播在培养土的表面,直径10cm 左右的培养盆内
盆播5~6点,每点播2~3粒,播种后用保鲜膜覆
盖培养盆,并在保鲜膜上用大头针或牙签扎5~6
个孔。若培养土表面不够湿润,可在点播好的种子
上滴2~3滴清水。播种后置于人工智能培养箱中
培养。培养条件设置为:光照4000lx ,16h ,温度0引言拟南芥(Arabidopsis thaliana )作为经典常规的模式植物,具有“植物界的果蝇”之称,属于十字花科(Brassicaceae )拟南芥属(Arabidopsis ),我国植物分类学者称之为鼠耳芥。因其植株小、生活周期短、生态类型丰富、分布广、基因组小(2n=10,基因组大小为125Mb ),容易进行诱变和遗传转
化[1],拟南芥广泛应用于分子生物学、植物遗传
学、发育生物学、功能基因组学等众多研究领域。25℃,空气相对湿度75%;黑暗8h ,温度22℃,空气相对湿度75%。
出苗后适时浇灌营养液,对幼苗生长很重要,
营养液配方见表1。
表1拟南芥培养液母液配方2000年,拟南芥基因组全序列测定工作已完成。目前国际上已有成熟的拟南芥栽培方法和材料,然而普通生物学实验条件下有效繁育所需要
的拟南芥生态型或品系植株并非易事[2,3]。在拟南
芥培养过程中,光照时间及强度、培养室温度、空
气湿度、pH 值、营养条件等对拟南芥的生长发育
影响至关重要[3,4]。实验室内的实际种植方法需要
不断摸索和改进。12341mol/L1mol/L1mol/L20mmol/LKNO 3·Ca (NO 3)24H 2O ·7H 2O MgSO 4101.1g 236.15g 246.48g 5.57g 7.45g
130.4g
9.12g
0.434g
1.7626g
0.0798g
0.172g
0.0432g
0.585g
0.00129g Fe ·EDTA FeSO 4EDTA KH 2PO 3·3H 2O K 2HPO 4各自配成溶液,再混合1材料方法1.1材料拟南芥为哥伦比亚型(Col ,Columbia )和兰德伯格(Ler ,Landsberg erecta )生态型;培养基质为公园土和校园土。51mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.6)H 3BO 3·H 2O MnSO 4·H 2O CuSO 41.2方法本实验采用土培直播法进行拟南芥的繁育。在培养盆底部覆盖一张干净的纸,将混合均匀的培养土装入培养盆中,并将培养盆放置在托盘上,一个托盘可放置1个或多个培养盆。播种
前先在托盘内加入适量清水,待培养土表面润湿
*基金项目:阜阳师范学院教研项目(2012JYXM55)
**并列第一作者
***通信作者6MS 微量元素·7H 2O ZnSO 4·2H 2O NaMO 4NaCl ·6H 2O CoCl 2以上母液均配制成1L
54生物学通报2015年第50卷第7期2
2.1结果分析各发育期栽培要点分析
苗期实验室栽培条件下,拟南芥播种后右),后者茎略显纤柔(图2左、图3左)。2.3影响拟南芥生长的主要因素1)湿度。维持2.1.1培养土的湿度是拟南芥种子萌发所必须的条件,
拟南芥喜湿润,最佳的生长环境为空气相对湿度
大于80%的温室。播种后需覆膜,以增加湿度,促
进拟南芥的萌发。2~3d 即可发芽(图1,本文附图见封三),发芽后的管理十分关键,否则极易死苗。出苗2~3周后,可进行适当间苗。理论上每穴留1~2株壮苗,未
出苗的穴可移苗补齐,每盆7~8株。间苗时用牙
签缓缓挑出幼苗,不可伤及根系。间苗时间也不宜
太晚,否则易伤及临近植株。间苗后覆上保鲜膜并
在其上扎小孔,进行缓苗。拟南芥不仅喜光照、而
且对湿度要求较高,因此,土壤含水量要高,一般
保持土壤表面湿润即可,水一般从培养器皿底部
吸入,而不是直接喷洒[5]。出苗后4~5周开始浇灌
营养液(表1)。营养液的量要适宜,以促进幼苗的
生长。水和营养液均加入托盘即可,直接给拟南芥
植株浇水,容易折损拟南芥植株或使其烂根。2)pH 值。在育苗期间,培养土(基)的pH 值应调整在5.5~5.8之间,过高或过低会降低种子的发芽率。3)水分要求。普通泥土培养基一般要浇营养液,但不必每天浇,可根据托盘大小安排。应注意及时浇水,托盆中不能长时间缺水,应表面土壤一干即浇,但托盆中的水也不宜太多,水分过多易导致烂根。4)温度。22℃培养箱恒温培养的植株生长较快,4~5周即开花,果实1周左右成熟。自然温度下
(8-10月期间,8~30℃,日均温
慢,但很健壮,6周左右可开花,果实成熟时间约2~2.1.2成株期拟南芥成株期植株较高,可在培养盆内插入细木条,供其攀爬,以防倒伏(图2)。此
时,适宜的营养及水分也十分重要,可根据培养土
的湿润情况,增加或减少水量。3周。培养箱培养温度高于28℃开花和结实均受到影响,花形态发育不正常花苞易干枯而败育,有的
花可形成果实,但多内空或种子小,不饱满。2.1.3花期如图3所示,拟南芥虽是自花传粉
植物,但在花期也应将不同生态型或基因型的植
株进行人工隔离,以防交叉传粉[6]。浇水及追施营
养液时尽量不要碰触植株,以防花粉大量散落,影
响结实。5)光照及光强。在培养箱中培养一般16h 光照,8h 黑暗,光照强度4000lx 条件下生长较好。6)培养土。拟南芥适宜在通气状况良好的基质上生长,粘质土壤易导致烂根,造成根系活力降
低,影响开花生长。
此外,植株密度、真菌及病虫害等都能影响拟
南芥的正常生长, 在种植拟南芥的过程中也需注意。2.1.4种子收获种子成熟后,用剪刀将成熟的荚果剪下,放在白纸上,然后用手指轻轻搓揉荚果,动作要轻缓,待种子完全散落后,将种荚果壳
取走,最后,将种子(图4)倒入1.5mL 的离心管
中保存。3讨论及展望植物科普是科学普及工作的重要组成部分。
2.2拟南芥实验室条件下生长状况比较经过然而提到植物科普,人们往往只想到植物多样性、
植物与生态、植物进化等方面。事实上,1970年
以来互联网信息技术与生物技术突飞猛进的发
展,彻底改变了人类生活。模式植物的研究为生物
技术的发展进步也做出了一定贡献。因此,植物科
普不能忽视模式植物及其突变体的开发应用。让
拟南芥等模式植物及其代表性突变体与社会大众
见面[7,8],使其栽培种植技术为一线生物学工作者
所掌握,实为科普工作的重要一环。
主要参考文献
1吕山花,樊颖伦,张文会,等. 不同pH 对拟南芥生长发育的栽培总结,拟南芥各主要生育期生态学指标统计结果如表2所示。表2实验室条件下拟南芥的生长发育情况统计培养成活率方法直播法(%)开花时莲座始花果荚每荚种子生活周期(周)株高(cm )直径(cm )时间(周)长度(cm )数(个)705~102~34~50.4~0.815~3013~16表2及图1~图4是拟南芥为哥伦比亚型(Col ,Columbia )和兰德伯格(Ler ,Landsberg erecta )生态型植株的主要特征,二者区别不大,仅在外形上前者成株期和花期茎较为直立(图2右、图3
2015年第50卷第7期生物学通报55
“用人口腔上皮细胞提取与鉴定DNA ”的实验改进
桑
摘要希(北京市第十一中学北京100050)“DNA 的粗提取和鉴定”是高二生物学必做的一项实验,鸡血红细胞、菜花、洋葱、
香蕉等实验材料均被广泛采用,各有利弊。推荐一种无成本且易获得的新材料:人口腔上皮细胞。经过几步简单的实验操作可提取到一定量的DNA ,实验现象明显且可以用二苯胺鉴定。
关键词DNA 的提取和鉴定口腔上皮细胞嫩肉粉实验教学
中国图书分类号:Q-33文献标识码:B
1实验选材和实验原理的变迁
“DNA 的粗提取与鉴定”实验为高中必做实漱口1min ,取漱口水加入试管,再加1mL 洗手液,振荡混匀,最后慢慢加入95%冷酒精,不要搅
拌混合,渐渐在溶液分界面上就会出现漂浮的验。以前每次做实验都需要大量购买加了抗凝剂
的鸡血,经静置沉淀获得DNA 含量丰富的鸡血红
细胞。实验步骤虽然复杂,但从选材原因到每次过
滤的目的与取舍,都蕴含着生物学的知识和理论,
实验现象很明显。因禽流感的原因,现多用植物材
料做此实验。洋葱、菜花的优势在于价格便宜,组
织近白色,但前者刺激性强,后者不易研磨,香蕉
价格较贵,但因为是三倍体,DNA 提取量多,总之
各有利弊。实验材料的改变也带来了裂解原理和
操作步骤的相应调整,研磨破壁,洗涤剂裂解细胞
膜,温度与变性的关系,嫩肉粉中蛋白酶的作用
等。再加上DNA 在不同浓度的食盐溶液中溶解度
的差异,二苯胺的鉴定原理等,一节课既讲原理又
做实验,时间相当紧张。DNA ,用玻璃棒缓慢搅动缠绕即可将其带出。如此简单就可以提取DNA ?需要多少口腔上皮才能提取到明显的丝状DNA ?经多次实践证明,这套方案的确可行且现象显著。由于书里给出的0.1g/mL(经计算基本相当于2mol/L,恰好是人教版教材中给出了DNA 溶解度较高的NaCl 浓度)的盐水浓度较高,漱口感觉很咸,而且入口的溶液涉及卫生问题,在称量和溶解的过程中不能使用实验室的器材,所以笔者将第1步进行了调整。随后按选修1中介绍的不同方法分别处理,意在比较提取量的差异;最后加上了鉴定步骤,并用分光光度计测量3种方法处理所得到的DNA 的吸光值,定量分析3种方法的
提取量,从而确认最佳方案。具体操作步骤如下:
第1步:学生自带水杯,含一口温开水漱口,
用手指轻揉双颊有助于口腔上皮细胞脱落,1min
后将漱口水吐入100mL 小烧杯中。从中取50mL
漱口水倒入小烧杯中,再加入5g NaCl 和10mL
稀释6~8倍的洗涤剂,搅拌至溶解,均分成5组
6
7高英杰, 张玮, 赵军锋,等. 拟南芥的室内培养技术进展. 新乡学院学报(自然科学版) ,2008,25(4):47—48. 2应用新材料进行不同实验方案的结果比较笔者在一套美国中小学实验教材《校园科学实验》丛书的《遗传科学实验》分册中看到一篇文章《从颊上皮细胞提取DNA 》,介绍了用人口腔上皮细胞提取DNA 的实验,所用试剂和操作过程如下:将1g 食盐溶解在10mL 蒸馏水中,用该盐水影响. 安徽农业科学,2008,36(29):12579—12580. !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 2
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5于政权, 孙颖. 拟南芥菜室内培养技术的改进. 河北师范大学学报(自然科学版),1999,23(4):499—550. 李俊华, 张艳春, 徐云远,等. 拟南芥室内培养技术. 植物学通报,2004,21(2):201—204. 冯燕妮,李和平,许学勇. 长江中下游地区拟南芥的栽培. 农技服务,2007(1):4—5. 王秀荣, 沈宏, 严小龙. 拟南芥室内繁种技术研究. 华南农业
大学学报(自然科学版),2002,23(3):94.Soon F. F., Ng L. M., Zhou X. E. et al . Molecular Mimicry Regulates ABA Signaling by SnRK2Kinases and PP2C Phos-phatases. Science,2012,335:85—88. 8Fujii H. ,Verslues P. E. ,Zhu K. J.. Arabidopsis decuple mutant reveals the importance of SnRK2kinases in osmotic stress responses in vivo.PNAS, 2011,108:1717—1722. (E -mail :[email protected])