实验４ 植物组织中自由水与束缚水含量的测定
自由水和束缚水含量常与植物生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官，代谢活动较旺盛，生长也较快；反之则生长较缓慢，但抗性较强。因此，自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。
【原理】
束缚水被细胞胶体颗粒所吸附，水势较低，故不易移动、蒸发和结冰，不能作为溶剂，也不易被夺取。可根据这些特点测定束缚水含量。将植物组织浸入浓糖液中脱水，经过一定的时间后易移动的自由水可全部进入糖液中，组织中剩余的水分可看作束缚水。根据糖液浓度变化可测得自由水量。由植物组织的总含水量减去自由水量，即可求出束缚水量。
【仪器与用具】
阿贝折射仪；电子顶载天平（感量0.1mg）；烘箱；称量瓶若干；打孔器（面积0.5cm2左右）；烧杯；瓷盘；量筒。
【试剂】
60%～65%蔗糖溶液（重量百分浓度）：称取蔗糖60～65g，置烧杯中加蒸馏水40～35g，使总重量为100g，溶解后备用。
【方法】
1.取称量瓶６个，编号（设三次重复），分别称准重量。
2.在田间选取生长一致的待测植物数株，选各部位、长势、叶龄等一致的有代表性的叶子数片。
3.用0.5cm2左右的打孔器在叶子两测（避开主脉）对称地打取小圆片共300片，分别随机地放入已编号地６个称量瓶中（各50片），盖紧，以免水分散失。
4.准确称取各瓶重量，求出各瓶样品鲜重。然后将其中３瓶置烘箱中于105℃下10min杀死组织，再于80℃下烘至恒重，求出组织含水量（％）。
将另外三个称量瓶中各加入60%～65%（重量百分浓度）蔗糖溶液５ml，再准确称量，算出各瓶糖液重量。于暗处放置4～6h，其间不时轻轻摇动。
5.到预定时间后，充分摇动溶液，用折射仪分别测定各瓶糖液浓度，同时测定原来的糖液浓度（折射仪用法见实验3），按下式求组织中自水和束缚水含量（％）。
G(D1－D2)/D2
自由水含量(%)=W100
式中 G－糖液量(g)；
D1－糖液原来浓度(％)；
D2－浸叶后糖液浓度(％)；
W－植物组织鲜重(g)。
束缚水含量（％）＝组织含水量（％）—自由水量（％）
表4-1 测定组织自由水和束缚水含量记载表
【思考题】
1.测定植物组织中自由水和束缚水的含量有何意义?
2.自由水和束缚水比值的大小与生长及抗性关系如何?
实验４ 植物组织中自由水与束缚水含量的测定
自由水和束缚水含量常与植物生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官，代谢活动较旺盛，生长也较快；反之则生长较缓慢，但抗性较强。因此，自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。
【原理】
束缚水被细胞胶体颗粒所吸附，水势较低，故不易移动、蒸发和结冰，不能作为溶剂，也不易被夺取。可根据这些特点测定束缚水含量。将植物组织浸入浓糖液中脱水，经过一定的时间后易移动的自由水可全部进入糖液中，组织中剩余的水分可看作束缚水。根据糖液浓度变化可测得自由水量。由植物组织的总含水量减去自由水量，即可求出束缚水量。
【仪器与用具】
阿贝折射仪；电子顶载天平（感量0.1mg）；烘箱；称量瓶若干；打孔器（面积0.5cm2左右）；烧杯；瓷盘；量筒。
【试剂】
60%～65%蔗糖溶液（重量百分浓度）：称取蔗糖60～65g，置烧杯中加蒸馏水40～35g，使总重量为100g，溶解后备用。
【方法】
1.取称量瓶６个，编号（设三次重复），分别称准重量。
2.在田间选取生长一致的待测植物数株，选各部位、长势、叶龄等一致的有代表性的叶子数片。
3.用0.5cm2左右的打孔器在叶子两测（避开主脉）对称地打取小圆片共300片，分别随机地放入已编号地６个称量瓶中（各50片），盖紧，以免水分散失。
4.准确称取各瓶重量，求出各瓶样品鲜重。然后将其中３瓶置烘箱中于105℃下10min杀死组织，再于80℃下烘至恒重，求出组织含水量（％）。
将另外三个称量瓶中各加入60%～65%（重量百分浓度）蔗糖溶液５ml，再准确称量，算出各瓶糖液重量。于暗处放置4～6h，其间不时轻轻摇动。
5.到预定时间后，充分摇动溶液，用折射仪分别测定各瓶糖液浓度，同时测定原来的糖液浓度（折射仪用法见实验3），按下式求组织中自水和束缚水含量（％）。
G(D1－D2)/D2
自由水含量(%)=W100
式中 G－糖液量(g)；
D1－糖液原来浓度(％)；
D2－浸叶后糖液浓度(％)；
W－植物组织鲜重(g)。
束缚水含量（％）＝组织含水量（％）—自由水量（％）
表4-1 测定组织自由水和束缚水含量记载表
【思考题】
1.测定植物组织中自由水和束缚水的含量有何意义?
2.自由水和束缚水比值的大小与生长及抗性关系如何?