土壤硝态氮测定方法

土壤硝态氮测定方法

操作步骤:

取5.00g土样,加入50ml2mol/lKCL溶液,振荡1小时,悬液静置3~5min后过滤。测定浸提液在220nm和275nm处吸光度A220和A275。按照下式计算校正吸光度A:

A= A220 -2A275

建立A与硝态氮浓度之间的相关曲线,即可计算出浸提液中硝态氮的浓度。

硝酸盐标准曲线制定:

称取0.7220g于105°C烘箱中干燥冷却后的KNO3于小烧杯中,加入二次蒸馏水溶解,定量转入1000ml容量瓶中,定容,摇匀,即为100ug/ml硝酸盐氮标准溶液。移取该溶液10.00ml于100ml容量瓶,定容,摇匀,即为10ug/ml硝酸盐氮标准溶液。分别取10ug/ml硝酸盐氮标准溶液0、1、2、3、4、5、6、7ml于50ml容量瓶中,加入二次重蒸水,定容摇匀。用1cm比色皿分别在220nm和275nm处测定吸光度。用公式:A= A220 -2A275求的校正吸光度。求此标准曲线方程。

按下式计算硝态氮:硝态氮(mg/kg)=C*V*D/m

式中:C为从标准曲线查得的NO3-—N含量:V为比色测定液总体积(mL);D为分取倍数;m为鲜土样质量(g)。

方法原理

利用硝酸盐和亚硝酸盐氮在203nm和230nm波长处有较强的紫外吸收峰.利用双波长系数倍率法的公式:AA=Au_KA 给硝酸盐氮选择合适的波长对,从而消除亚硝酸盐、有机质的影响。消除干扰后,硝酸盐氮的含量与△A呈线性关系.线性范围是O~2.0ms/L。由此建立了测定土壤硝态氮的新方法。

1主要仪器与试剂

UV一24|D1紫外一可见分光光度计(日本岛津公司);振荡器(振次:243V/rain);恒温干燥箱;二次蒸馏水器。

硝酸盐氮标准液:称取0.7220g于105℃烘箱中烘2h,干燥冷却后的KNO 于小烧杯中,加人二次蒸馏水溶解,定量转人1000mL的容量瓶中,定容.摇匀,即为1001xg/mL硝酸盐氮标准液。移取该溶液10.00mL于100ml容量瓶中.定容,摇匀,即为lOIxg/mL的硝酸盐氮标准使用液。

2吸收曲线与系数K的确定

准确移取101xg/mL的硝酸盐氮标准使用液2.00mL于25mL磨口比色管中,定容,摇匀。用lcm的石英比色皿,以二次蒸馏水作参比.在UV一2401紫外一可见分光光度计上测量不同波长下的吸光度.见图1。选取203nm、23Onm为测试波长,按公式K=Aad A 进行计算,求得K的平均值为2.75。

3标准曲线的绘制

分别取10.00~gCmL 硝酸盐氮标准使用液0,0.25,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5mL置于25mL磨121比色管中.各管中加入二次蒸馏水至刻度。摇匀.用UV-2401紫外一可见分光光度计在203nm和230nm处.用1cm石英比色皿测定吸光度。用A旷2.75A 的计算方法求得校正吸光度。标准曲线的回归方程为y=0.5283x-0.0009.r=0.9999(n:7 )。 4样品测定方法

准确称取lOg充分拌匀的鲜土壤.分别置于100mL具塞三角瓶中,加入0.1gc~so 和

50.OOmL二次蒸馏水。于振

荡器上振荡10min。放置10min后.将悬液的上部清液用干滤纸过滤.吸取滤液1.00~

20.OOmL(视NO3-N的浓度而定,置于25mL磨口比色管中,用水准确稀释至刻度.分别在203nm、230nm波长下测量吸光度,按下式计算硝态氮:硝态氮(mg/kg)=Cx25xD/m 式中:C为从标准曲线查得的NO3- 一N含量:25为磨口比

色测定液总体积(mL);D为分取倍数;m为鲜土样质量(g)。

土壤硝态氮测定方法

操作步骤:

取5.00g土样,加入50ml2mol/lKCL溶液,振荡1小时,悬液静置3~5min后过滤。测定浸提液在220nm和275nm处吸光度A220和A275。按照下式计算校正吸光度A:

A= A220 -2A275

建立A与硝态氮浓度之间的相关曲线,即可计算出浸提液中硝态氮的浓度。

硝酸盐标准曲线制定:

称取0.7220g于105°C烘箱中干燥冷却后的KNO3于小烧杯中,加入二次蒸馏水溶解,定量转入1000ml容量瓶中,定容,摇匀,即为100ug/ml硝酸盐氮标准溶液。移取该溶液10.00ml于100ml容量瓶,定容,摇匀,即为10ug/ml硝酸盐氮标准溶液。分别取10ug/ml硝酸盐氮标准溶液0、1、2、3、4、5、6、7ml于50ml容量瓶中,加入二次重蒸水,定容摇匀。用1cm比色皿分别在220nm和275nm处测定吸光度。用公式:A= A220 -2A275求的校正吸光度。求此标准曲线方程。

按下式计算硝态氮:硝态氮(mg/kg)=C*V*D/m

式中:C为从标准曲线查得的NO3-—N含量:V为比色测定液总体积(mL);D为分取倍数;m为鲜土样质量(g)。

方法原理

利用硝酸盐和亚硝酸盐氮在203nm和230nm波长处有较强的紫外吸收峰.利用双波长系数倍率法的公式:AA=Au_KA 给硝酸盐氮选择合适的波长对,从而消除亚硝酸盐、有机质的影响。消除干扰后,硝酸盐氮的含量与△A呈线性关系.线性范围是O~2.0ms/L。由此建立了测定土壤硝态氮的新方法。

1主要仪器与试剂

UV一24|D1紫外一可见分光光度计(日本岛津公司);振荡器(振次:243V/rain);恒温干燥箱;二次蒸馏水器。

硝酸盐氮标准液:称取0.7220g于105℃烘箱中烘2h,干燥冷却后的KNO 于小烧杯中,加人二次蒸馏水溶解,定量转人1000mL的容量瓶中,定容.摇匀,即为1001xg/mL硝酸盐氮标准液。移取该溶液10.00mL于100ml容量瓶中.定容,摇匀,即为lOIxg/mL的硝酸盐氮标准使用液。

2吸收曲线与系数K的确定

准确移取101xg/mL的硝酸盐氮标准使用液2.00mL于25mL磨口比色管中,定容,摇匀。用lcm的石英比色皿,以二次蒸馏水作参比.在UV一2401紫外一可见分光光度计上测量不同波长下的吸光度.见图1。选取203nm、23Onm为测试波长,按公式K=Aad A 进行计算,求得K的平均值为2.75。

3标准曲线的绘制

分别取10.00~gCmL 硝酸盐氮标准使用液0,0.25,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5mL置于25mL磨121比色管中.各管中加入二次蒸馏水至刻度。摇匀.用UV-2401紫外一可见分光光度计在203nm和230nm处.用1cm石英比色皿测定吸光度。用A旷2.75A 的计算方法求得校正吸光度。标准曲线的回归方程为y=0.5283x-0.0009.r=0.9999(n:7 )。 4样品测定方法

准确称取lOg充分拌匀的鲜土壤.分别置于100mL具塞三角瓶中,加入0.1gc~so 和

50.OOmL二次蒸馏水。于振

荡器上振荡10min。放置10min后.将悬液的上部清液用干滤纸过滤.吸取滤液1.00~

20.OOmL(视NO3-N的浓度而定,置于25mL磨口比色管中,用水准确稀释至刻度.分别在203nm、230nm波长下测量吸光度,按下式计算硝态氮:硝态氮(mg/kg)=Cx25xD/m 式中:C为从标准曲线查得的NO3- 一N含量:25为磨口比

色测定液总体积(mL);D为分取倍数;m为鲜土样质量(g)。


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