标题: 固氮微生物肥料的生产和应用现状及发展前景
摘要:固氮微生物肥料可以增加作物的产量,在农业生产中具有重要的作用。目前应用最多的主要是根瘤菌,生物固氮越来越受到重视,它将向更深更远的方向发展。
Abstract :Population can increase the plant’s output in agriculture has an important role. At present , the most applied largely root nodule truffles , and biological nitrogen fixation more attention , it will be more further developed. 关键词:固氮微生物 生物固氮 生产 根瘤菌 应用 研究方向
Key words: Nitrogen-fixing microbial biological nitrogen fixation
production application research direction
主题:固氮微生物肥料
众所周知,农业生产长期过分依赖于化学肥料和农药,造成大量不可再生能源的浪费,农田土质变坏,肥力下降.农作物品质降低,食品和地下水等环境污染状况也日趋严最。随着生态农业和绿色食品生产的兴起和发展,加之我国大多数土壤中速效磷、钾匣其它一些养分的缺乏,微生物肥料作为生物技术发展和农业生产的一类重要肥源以及它对农作物生长的多种功能和作用特点,再一次引起人们的重视,并得到一定的发展空间,目前已成为国内外研究的热点。(1)
固氮微生物肥料是利用自生固氮菌和联合固氮微生物生产的固氮菌类肥。根据目前的资料表明,固氮生物都是原核生物,包括微生物中的某些细菌、放线菌和蓝细菌。现在已发现固氮微生物多达60个以上的属,随着研究手段的不断提高,发现的固氮微生物种类会愈来愈多。通过微生物的固氮作用增加土壤的氮含量并促进粮食增产的一种环境友好型生物肥料,相对于传统氮肥具有污染小,效率高等优势。
固氮微生物的作用机理:
自生固氮微生物自由生活在土壤或水域中,能独立进行固氮,它们在将分子态氮固定成NH 后,并不将NH3释放到环境中,而是合成氨基酸,组成自身的蛋白质。只有当自生固氮微生物死亡,它们细胞中的有机氮被分解成NH3后,NH3与水化合成NH3〃H20,NH3‘H20进一步电离出NH4 ,NH4 才能被植物的根系吸收;或Nil3被硝化细菌进一步氧化为NO 一,以NO3一的形式被植物的根系吸收。(2)
各类固氮微生物进行固氮作用的基本反应是相同的:
N2+8H++8e-+16MgATP→2NH3+H2+16MgADP+16Pi
能够固氮的微生物都有生物固氮过程中的关键因子--固氮酶,这种酶的一个重要特性是对氧的敏感性,在有氧条件下会使它不可逆失活。生物固氮中的能量供应和氨效应也是限制这一生物合成过程的另二个限制因素。
生物固氮与工业上的化学固氮相比,有以下四个方面的优点:
①生物固氮过程无需在高温高压下进行。
在常温常压下依靠微生物本身的固氮酶催化作用,实现将氮分子转化成
氨,供植物吸收利用。虽然生物固氮也是一个消耗能量的过程,但是提供能量的是植物,能量主要靠植物以太阳光为能源的光合作用。与化学固氮相比成本低廉。
②质优。
以豆科植物和根瘤菌共生体系来看,植物向根瘤菌提供能量,存在于根瘤中的根瘤菌(以类菌体形态存在)将氮分子转化成氨,然后通过氨同化系统迅速将氨转化成谷氨酰胺一类的优质氮化合物被植物吸收。而且共生体系固定的氮大部分被输送到籽粒中去,这也是豆科植物种子蛋白质含量高的一个重要原因。
③利用率高。
化肥氮施入到田间,植物所能吸收利用的效率在20%~60%,其余的要么形成气态氮释放到空气中,要么随水淋溶流失。而生物固氮,尤其是共生固氮体系,大部分都被农作物直接吸收利用,少量的随着分泌过程和根瘤衰老破溃,留在土壤中给下一季作物利用。表现了十分高的利用率。
④不污染环境。
氮肥的大量使用而转化成的硝态氮,有相当一部分淋溶,造成溪流、地下水和海洋的硝酸盐污染。另一方面施入土壤中的化学氮,由于反硝化作用,释放出的氮气破坏正常的氮素循环。而生物固氮则不存在这个问题。
目前,用于生产此类微生物肥料的菌种主要有:圆褐固氮菌或称为褐球固氮菌(Azotobacter chroococum);棕色固氮菌亦称维涅兰德固氮菌(Azotobacter chroococum);德氏拜叶林克氏固氮菌(Beijerinckia derxii)和克氏杆菌属(Klebsiella spp.)、肠道杆菌属(Enterobacter spp.)及产碱杆菌属(Alcaligenes spp.)中的某些菌。(2)
圆褐固氮菌是固氮菌属中的一种,革兰氏阴性杆菌,细胞呈大卵圆形,大小2um*5um,常成对,周生鞭毛运动,不形成芽孢,但能形成厚壁的孢囊和荚膜粘液。不产生水溶性的色素,但在琼脂培养基上的生长物具有特征性的非水溶性的褐色色素,有些菌株的这种色素时间长会变成黑色。细胞内含有很多颗粒体,菌体外面有荚膜。需要说明的是,圆褐固氮菌的菌体形态多变,幼龄时菌体为杆状,细胞单独存在或两个联接呈“8”字形,老龄细胞缩短,呈椭圆形或圆形。不同的圆褐固氮菌菌株固氮作用存在明显差异,低的菌株利用1克葡萄糖仅能固定5毫克氮素最高的可达20毫克。(3)
棕色固氮菌也是固氮菌属中的一种。在形态和培养特征上都十分相似,但能产生在紫外灯下呈绿色水溶性的荧光色素;在琼脂培养基上的生长物具有特征性的非水溶性棕色色素;它可利用鼠李糖,这是棕色固氮菌与该属的其他种的区别。
肺炎克氏杆菌(Klebsiella Pneumoniae)的某些菌株发现有一定的固氮作用和刺激作用,从分类的角度上看,该菌属于可能的条件致病菌。1997年山东潍坊医学院报道了9例新生儿脐带感染的9株病原菌中有4株是肺炎克氏
杆菌。所以选用肺炎克氏杆菌生产菌株必须进行有关毒性、病源等方面的鉴定,证明其无毒和非病原性后才能应用。
在应用中必须注意的几个问题:
A:适用作物:多为禾本科,也有用于蔬菜;有小麦、水稻和玉米专用;也有不强调作物种类的。
B:使用剂量:符合国家标准的固氮菌剂每亩地用量250——1000克,液体菌剂每亩100——200毫升。
C:使用技术:多为拌种,水稻还可用于插秧时的蘸根,也可用于作物生长的关键阶段的叶面喷施。使用时尽量避免与速效氮联合使用,不能与杀细菌药剂、草木灰等并用。使用时避免直射阳光,当天拌种,当天用完。
D:菌剂保存:由于是活的生物制剂,需要一定的保存条件,尤以温度影响较大,高温是菌剂保存时间长短的重要制约因素。极性种类也对有效菌的保存有重大影响。
E:固氮菌肥与有机肥配合使用:有机肥对固氮菌的活动有良好的影响,在施用大量有机肥的同时使用固氮菌肥可获得极好的增产效果。(4)
共生固氮微生物肥料的农业应用:
根瘤菌肥是这类肥料在农业生产中的主要品种,它是微生物肥料中使用最早的,应用的国家和地区最多,应用效果最稳定的微生物制剂。
根瘤菌的应用原理将科学家经过各种手段筛选出来的固氮能力、侵染结瘤和竞争能力强的根瘤菌株制成根瘤菌肥,在豆科植物种植之前拌在种子上或接种在土壤里,以形成二者的共生固氮,达到增产和提高品质的目的。这是一条农业上事半功倍的有效途径。根瘤菌肥在我国的应用效益十分良好,投入和产出比在1:10——20以上。
根瘤菌肥料的生产和应用根瘤菌肥料的生产过程与一般的微生物肥料的生产基本一致。但对于无菌条件的要求更为严格,这是因为快生根瘤菌繁殖一代的时间3——4个小时,慢生根瘤菌需8——10个小时,这比各种杂菌来,显然要长得多。在生产中稍有疏忽或设备上的小漏洞常常造成发酵失败。
生产的根瘤菌肥料种类较多,不仅有用于大豆、花生、菜豆、绿豆等粮食、油料和蔬菜豆科接种剂,也有三叶草、苜蓿、紫云英等豆科牧草或绿肥的接种剂。根瘤菌肥的剂型主要是液体和固体两类,固体剂型国内生产多为草炭粉剂,也有用土肥、稻壳、蛭石、褐煤、秸秆、堆肥、糖厂废料等作为吸附材料。用于吸附的载体细度须达到一定的要求,并须预先灭菌。
生物固氮在农业生产中的应用:
生物固氮在农业生产中具有十分重要的作用。氮素是农作物从土壤中吸收的一种大量元素,土壤每年因此要失去大量的氮素。如果土壤每年得不到大量的氮素以弥补损失,土壤的含氮量就会下降。土壤可以通过两种途径获得氮素:一条是含氮肥料(包括氮素化肥和各种农家肥)的施用;另一条是生物固氮。科学家在20世纪80年代推算过,全世界每年施用的氮素化肥中
的氮素大约有8乘10的7次方,而自然界每年通过生物固氮所提供的氮素,则高达4乘10的8次方。
对豆科作物进行根瘤菌拌种,是提高豆科作物产量的一项有效措施。播种前,将豆科作物的种子沾上与该种豆科作物相适应的根瘤菌,这显然有利于该豆科作物结瘤固氮。特别是新开垦的农田和未种植过豆科作物的土壤中,根瘤菌很少,并且常常不能使豆科作物结瘤固氮,更需要进行根瘤菌拌种。对比实验表明,在其他条件相同的情况下,经过根瘤菌拌种的豆科作物,可增产10%——20%。
用豆科作物做绿肥,例如将田菁、苜蓿或紫云英等的新鲜植物直接耕埋或堆沤后施用到农田中,可以明显增加土壤中氮的含量。科学家统计过,一般地说,1公顷农田施用7500kg绿肥,可以增产粮食750kg。如果用新鲜的豆科植物饲养家畜,再将家畜的粪便还田,既可以使土壤肥沃,又可以获得更多的粮食和畜产品。
固氮微生物肥料的研究方向及发展前景:
随着分子生物学的进展,固氮的遗传工程受到了广泛重视,已成为目前最活跃的研究领域。遗传工程是用人工方法去改变生物体的遗传特性或者按照人们的意愿去创造新物种。对于固氮微生物来说,固氮基因操纵和调节固氮酶的合成,从而使固氮微生物具有固氮作用。如果将固氮基因进行人工转移,就可能获得具有固氮作用的新物种。
有关这方面的研究目前主要在以下几方面进行探索:一是培育新的固氮微生物,以提高固氮效率或赋予非固氮微生物以固氮能力;二是改变结瘤的识别过程或将固氮基因转移到根瘤菌病杆菌中,以使非豆科植物结瘤固氮,扩大固氮作物的范围;三是应用遗传工程培育不依赖固氮微生物的自主固氮的植物。这些研究如能成功,将对农业生产产生深刻的影响。
尽管人们在生物固氮的研究上取得一定进展,但真正应用于实际的科技成果还不能满足农业生产的需要。因此,加强对现有生物固氮体系的利用,是当前增加固氮总量的最有效途径。目前采取的主要措施应该是扩大各种豆科植物的种植面积,包括增加豆科绿肥、豆科牧草及豆科作物的面积。然而我国大豆种植面积也在不断减少,逐渐被高产的水稻、玉米等粮食作物所代替,各种豆科作物与禾本科作物的间作、轮作、套种等也已不多见了。由于豆科植物种植面积的减少,使全国的生物固氮总量在减少。因此,我们呼吁要尽快恢复绿肥的种植面积。(5)
在能源紧张和环境污染的双重压力下,传统的固氮方式已经难以适应各种需求,使生物固氮研究得到更加应有的重视。如果主要农作物能够自主固氮,就可以摆脱对化肥的依赖性,既节省能源,又能对环境友好。这将是继工业革命之后,人们期待的一次“绿色革命”!
参考文献:
1】《微生物肥料作用机理的研究新进展》—作者:刘健 微生物学杂志
2001年3月第2l卷
2】《关于生物固氮的几点认识》--生物学教学2008年(第33卷)第8期 3】《中国种植业大观.肥料卷》我国微生物肥料研究有新突破 禾本科作物固氮技术世界领先--《农村科技》1994年04期
4】《浅析微生物肥料的特点及存在的问题》——《中国科技纵横》——2010年第11期 作者:刘景德
5】《生物固氮在我国农业生产中的研究现状及发展对策》—朱奇 微生物学杂志2003年9月第23卷第5期
标题: 固氮微生物肥料的生产和应用现状及发展前景
摘要:固氮微生物肥料可以增加作物的产量,在农业生产中具有重要的作用。目前应用最多的主要是根瘤菌,生物固氮越来越受到重视,它将向更深更远的方向发展。
Abstract :Population can increase the plant’s output in agriculture has an important role. At present , the most applied largely root nodule truffles , and biological nitrogen fixation more attention , it will be more further developed. 关键词:固氮微生物 生物固氮 生产 根瘤菌 应用 研究方向
Key words: Nitrogen-fixing microbial biological nitrogen fixation
production application research direction
主题:固氮微生物肥料
众所周知,农业生产长期过分依赖于化学肥料和农药,造成大量不可再生能源的浪费,农田土质变坏,肥力下降.农作物品质降低,食品和地下水等环境污染状况也日趋严最。随着生态农业和绿色食品生产的兴起和发展,加之我国大多数土壤中速效磷、钾匣其它一些养分的缺乏,微生物肥料作为生物技术发展和农业生产的一类重要肥源以及它对农作物生长的多种功能和作用特点,再一次引起人们的重视,并得到一定的发展空间,目前已成为国内外研究的热点。(1)
固氮微生物肥料是利用自生固氮菌和联合固氮微生物生产的固氮菌类肥。根据目前的资料表明,固氮生物都是原核生物,包括微生物中的某些细菌、放线菌和蓝细菌。现在已发现固氮微生物多达60个以上的属,随着研究手段的不断提高,发现的固氮微生物种类会愈来愈多。通过微生物的固氮作用增加土壤的氮含量并促进粮食增产的一种环境友好型生物肥料,相对于传统氮肥具有污染小,效率高等优势。
固氮微生物的作用机理:
自生固氮微生物自由生活在土壤或水域中,能独立进行固氮,它们在将分子态氮固定成NH 后,并不将NH3释放到环境中,而是合成氨基酸,组成自身的蛋白质。只有当自生固氮微生物死亡,它们细胞中的有机氮被分解成NH3后,NH3与水化合成NH3〃H20,NH3‘H20进一步电离出NH4 ,NH4 才能被植物的根系吸收;或Nil3被硝化细菌进一步氧化为NO 一,以NO3一的形式被植物的根系吸收。(2)
各类固氮微生物进行固氮作用的基本反应是相同的:
N2+8H++8e-+16MgATP→2NH3+H2+16MgADP+16Pi
能够固氮的微生物都有生物固氮过程中的关键因子--固氮酶,这种酶的一个重要特性是对氧的敏感性,在有氧条件下会使它不可逆失活。生物固氮中的能量供应和氨效应也是限制这一生物合成过程的另二个限制因素。
生物固氮与工业上的化学固氮相比,有以下四个方面的优点:
①生物固氮过程无需在高温高压下进行。
在常温常压下依靠微生物本身的固氮酶催化作用,实现将氮分子转化成
氨,供植物吸收利用。虽然生物固氮也是一个消耗能量的过程,但是提供能量的是植物,能量主要靠植物以太阳光为能源的光合作用。与化学固氮相比成本低廉。
②质优。
以豆科植物和根瘤菌共生体系来看,植物向根瘤菌提供能量,存在于根瘤中的根瘤菌(以类菌体形态存在)将氮分子转化成氨,然后通过氨同化系统迅速将氨转化成谷氨酰胺一类的优质氮化合物被植物吸收。而且共生体系固定的氮大部分被输送到籽粒中去,这也是豆科植物种子蛋白质含量高的一个重要原因。
③利用率高。
化肥氮施入到田间,植物所能吸收利用的效率在20%~60%,其余的要么形成气态氮释放到空气中,要么随水淋溶流失。而生物固氮,尤其是共生固氮体系,大部分都被农作物直接吸收利用,少量的随着分泌过程和根瘤衰老破溃,留在土壤中给下一季作物利用。表现了十分高的利用率。
④不污染环境。
氮肥的大量使用而转化成的硝态氮,有相当一部分淋溶,造成溪流、地下水和海洋的硝酸盐污染。另一方面施入土壤中的化学氮,由于反硝化作用,释放出的氮气破坏正常的氮素循环。而生物固氮则不存在这个问题。
目前,用于生产此类微生物肥料的菌种主要有:圆褐固氮菌或称为褐球固氮菌(Azotobacter chroococum);棕色固氮菌亦称维涅兰德固氮菌(Azotobacter chroococum);德氏拜叶林克氏固氮菌(Beijerinckia derxii)和克氏杆菌属(Klebsiella spp.)、肠道杆菌属(Enterobacter spp.)及产碱杆菌属(Alcaligenes spp.)中的某些菌。(2)
圆褐固氮菌是固氮菌属中的一种,革兰氏阴性杆菌,细胞呈大卵圆形,大小2um*5um,常成对,周生鞭毛运动,不形成芽孢,但能形成厚壁的孢囊和荚膜粘液。不产生水溶性的色素,但在琼脂培养基上的生长物具有特征性的非水溶性的褐色色素,有些菌株的这种色素时间长会变成黑色。细胞内含有很多颗粒体,菌体外面有荚膜。需要说明的是,圆褐固氮菌的菌体形态多变,幼龄时菌体为杆状,细胞单独存在或两个联接呈“8”字形,老龄细胞缩短,呈椭圆形或圆形。不同的圆褐固氮菌菌株固氮作用存在明显差异,低的菌株利用1克葡萄糖仅能固定5毫克氮素最高的可达20毫克。(3)
棕色固氮菌也是固氮菌属中的一种。在形态和培养特征上都十分相似,但能产生在紫外灯下呈绿色水溶性的荧光色素;在琼脂培养基上的生长物具有特征性的非水溶性棕色色素;它可利用鼠李糖,这是棕色固氮菌与该属的其他种的区别。
肺炎克氏杆菌(Klebsiella Pneumoniae)的某些菌株发现有一定的固氮作用和刺激作用,从分类的角度上看,该菌属于可能的条件致病菌。1997年山东潍坊医学院报道了9例新生儿脐带感染的9株病原菌中有4株是肺炎克氏
杆菌。所以选用肺炎克氏杆菌生产菌株必须进行有关毒性、病源等方面的鉴定,证明其无毒和非病原性后才能应用。
在应用中必须注意的几个问题:
A:适用作物:多为禾本科,也有用于蔬菜;有小麦、水稻和玉米专用;也有不强调作物种类的。
B:使用剂量:符合国家标准的固氮菌剂每亩地用量250——1000克,液体菌剂每亩100——200毫升。
C:使用技术:多为拌种,水稻还可用于插秧时的蘸根,也可用于作物生长的关键阶段的叶面喷施。使用时尽量避免与速效氮联合使用,不能与杀细菌药剂、草木灰等并用。使用时避免直射阳光,当天拌种,当天用完。
D:菌剂保存:由于是活的生物制剂,需要一定的保存条件,尤以温度影响较大,高温是菌剂保存时间长短的重要制约因素。极性种类也对有效菌的保存有重大影响。
E:固氮菌肥与有机肥配合使用:有机肥对固氮菌的活动有良好的影响,在施用大量有机肥的同时使用固氮菌肥可获得极好的增产效果。(4)
共生固氮微生物肥料的农业应用:
根瘤菌肥是这类肥料在农业生产中的主要品种,它是微生物肥料中使用最早的,应用的国家和地区最多,应用效果最稳定的微生物制剂。
根瘤菌的应用原理将科学家经过各种手段筛选出来的固氮能力、侵染结瘤和竞争能力强的根瘤菌株制成根瘤菌肥,在豆科植物种植之前拌在种子上或接种在土壤里,以形成二者的共生固氮,达到增产和提高品质的目的。这是一条农业上事半功倍的有效途径。根瘤菌肥在我国的应用效益十分良好,投入和产出比在1:10——20以上。
根瘤菌肥料的生产和应用根瘤菌肥料的生产过程与一般的微生物肥料的生产基本一致。但对于无菌条件的要求更为严格,这是因为快生根瘤菌繁殖一代的时间3——4个小时,慢生根瘤菌需8——10个小时,这比各种杂菌来,显然要长得多。在生产中稍有疏忽或设备上的小漏洞常常造成发酵失败。
生产的根瘤菌肥料种类较多,不仅有用于大豆、花生、菜豆、绿豆等粮食、油料和蔬菜豆科接种剂,也有三叶草、苜蓿、紫云英等豆科牧草或绿肥的接种剂。根瘤菌肥的剂型主要是液体和固体两类,固体剂型国内生产多为草炭粉剂,也有用土肥、稻壳、蛭石、褐煤、秸秆、堆肥、糖厂废料等作为吸附材料。用于吸附的载体细度须达到一定的要求,并须预先灭菌。
生物固氮在农业生产中的应用:
生物固氮在农业生产中具有十分重要的作用。氮素是农作物从土壤中吸收的一种大量元素,土壤每年因此要失去大量的氮素。如果土壤每年得不到大量的氮素以弥补损失,土壤的含氮量就会下降。土壤可以通过两种途径获得氮素:一条是含氮肥料(包括氮素化肥和各种农家肥)的施用;另一条是生物固氮。科学家在20世纪80年代推算过,全世界每年施用的氮素化肥中
的氮素大约有8乘10的7次方,而自然界每年通过生物固氮所提供的氮素,则高达4乘10的8次方。
对豆科作物进行根瘤菌拌种,是提高豆科作物产量的一项有效措施。播种前,将豆科作物的种子沾上与该种豆科作物相适应的根瘤菌,这显然有利于该豆科作物结瘤固氮。特别是新开垦的农田和未种植过豆科作物的土壤中,根瘤菌很少,并且常常不能使豆科作物结瘤固氮,更需要进行根瘤菌拌种。对比实验表明,在其他条件相同的情况下,经过根瘤菌拌种的豆科作物,可增产10%——20%。
用豆科作物做绿肥,例如将田菁、苜蓿或紫云英等的新鲜植物直接耕埋或堆沤后施用到农田中,可以明显增加土壤中氮的含量。科学家统计过,一般地说,1公顷农田施用7500kg绿肥,可以增产粮食750kg。如果用新鲜的豆科植物饲养家畜,再将家畜的粪便还田,既可以使土壤肥沃,又可以获得更多的粮食和畜产品。
固氮微生物肥料的研究方向及发展前景:
随着分子生物学的进展,固氮的遗传工程受到了广泛重视,已成为目前最活跃的研究领域。遗传工程是用人工方法去改变生物体的遗传特性或者按照人们的意愿去创造新物种。对于固氮微生物来说,固氮基因操纵和调节固氮酶的合成,从而使固氮微生物具有固氮作用。如果将固氮基因进行人工转移,就可能获得具有固氮作用的新物种。
有关这方面的研究目前主要在以下几方面进行探索:一是培育新的固氮微生物,以提高固氮效率或赋予非固氮微生物以固氮能力;二是改变结瘤的识别过程或将固氮基因转移到根瘤菌病杆菌中,以使非豆科植物结瘤固氮,扩大固氮作物的范围;三是应用遗传工程培育不依赖固氮微生物的自主固氮的植物。这些研究如能成功,将对农业生产产生深刻的影响。
尽管人们在生物固氮的研究上取得一定进展,但真正应用于实际的科技成果还不能满足农业生产的需要。因此,加强对现有生物固氮体系的利用,是当前增加固氮总量的最有效途径。目前采取的主要措施应该是扩大各种豆科植物的种植面积,包括增加豆科绿肥、豆科牧草及豆科作物的面积。然而我国大豆种植面积也在不断减少,逐渐被高产的水稻、玉米等粮食作物所代替,各种豆科作物与禾本科作物的间作、轮作、套种等也已不多见了。由于豆科植物种植面积的减少,使全国的生物固氮总量在减少。因此,我们呼吁要尽快恢复绿肥的种植面积。(5)
在能源紧张和环境污染的双重压力下,传统的固氮方式已经难以适应各种需求,使生物固氮研究得到更加应有的重视。如果主要农作物能够自主固氮,就可以摆脱对化肥的依赖性,既节省能源,又能对环境友好。这将是继工业革命之后,人们期待的一次“绿色革命”!
参考文献:
1】《微生物肥料作用机理的研究新进展》—作者:刘健 微生物学杂志
2001年3月第2l卷
2】《关于生物固氮的几点认识》--生物学教学2008年(第33卷)第8期 3】《中国种植业大观.肥料卷》我国微生物肥料研究有新突破 禾本科作物固氮技术世界领先--《农村科技》1994年04期
4】《浅析微生物肥料的特点及存在的问题》——《中国科技纵横》——2010年第11期 作者:刘景德
5】《生物固氮在我国农业生产中的研究现状及发展对策》—朱奇 微生物学杂志2003年9月第23卷第5期