农杆菌LBA4404感受态的制备
2009-09-11 09:44
从YEB平板上挑取单菌落接种于含50mg/lRif（利福平）、40mg/lStr（链霉素）的YEB液体培养基中，28度、220rpm摇荡过夜。
取上述过夜培养物0.5ml加入到50ml（含上抗生素）YEB培养基中，28度、280rpm快摇，使其OD600达到0.5左右（摇菌时间视菌种而定）。
将菌液水浴30min，4度、6000rpm离心10min，收集菌体，加入10ml预冷的0.15mol/lNaCl悬浮细胞。
4度、6000rpm离心10min。
弃上清，加入1ml预冷的20mmol/lCaCl2重悬细胞，分装于1.5ml离心管中，液氮中速冻，－70度保存。
20mmol/lCaCl2可以一次配置分装储存于－70度，一次一支
农杆菌LBA4404感受态的制备
2009-09-11 09:44
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取上述过夜培养物0.5ml加入到50ml（含上抗生素）YEB培养基中，28度、280rpm快摇，使其OD600达到0.5左右（摇菌时间视菌种而定）。
将菌液水浴30min，4度、6000rpm离心10min，收集菌体，加入10ml预冷的0.15mol/lNaCl悬浮细胞。
4度、6000rpm离心10min。
弃上清，加入1ml预冷的20mmol/lCaCl2重悬细胞，分装于1.5ml离心管中，液氮中速冻，－70度保存。
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